Solução Azul de Tripan 0,4 em PBS 1X

Descrição

• Azul de Tripan 0,4% em PBS

• Código Nº: BR30084-01

• Apresentação: 100 mL

• Armazenamento: 15°-30°C

• O Trypan Blue é um corante vital. A reatividade deste se baseia no fato do cromóforo ser negativamente carregado e não interagir com as células a menos que a membrana esteja danificada. Assim as células que excluem o corante são teoricamente viáveis.

Contagem de células viáveis usando Tripan Blue 0,4% em PBS

1. Colocar 0.5 mL da suspensão celular (diluir as células em meio completo sem soro, a uma concentração aproximada de 1 x 105 a 2 x 105 cél. por mL) em um tubo com tampa de rosca.

2. Adicionar 0.1 mL do corante 0.4% de Trypan Blue. Misturar bem até homogeneidade.

3. Deixar em repouso durante 5 min. a temperatura ambiente.

4. Despejar o conteúdo no hemocitômetro (câmara de Neubauer) para a contagem celular.

5. Observar ao microscópio, se as células mortas estão coradas e as células viáveis excluíram o corante.

Referências:

1. Freshney, R. (1987) Culture of Animal Cells: A Manual of Basic Technique, p. 117, Alan R. Liss, Inc., New York.

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