TMB – Solução Cromogênica de Tetrametilbenzidina
• TMB – 3, 3′, 5, 5′-Tetramethylbenzidine One component Microweel Substrate
• Código: 13-2023-02
• Apresentação: 200 mL
• Temp. de Armazenamento: 2-8°C
Descrição:
• TMB One Component Microwell Substrate, em pó pode ser utilizado na preparação de soluções pronta-para-uso para ser utilizada em reações de ELISA (Enzyme-linked immunosorbent assay).
• O produto final da reação de ELISA se apresenta como uma solução de coloração azulada que pode ser medida em 370 nm ou entre 620-650 nm. Este produto pode ser utilizado para reações de ponto final e reações de cinética de ligação.
• A reação enzima-substrato (TMB) pode ser detida utilizando uma solução TMB Stop Solution (ácido sulfúrico 2N) ou alguma outra solução obtida comercialmente. Este produto não é recomendado para aplicações em estudos de membrana imunohistoquímica, pois estes ensaios requerem precipitação específica de produto.
• Manuseio e armazenamento:
• Armazenamento recomendado entre 2-8°C. Este produto é altamente estável desde que armazenado nas condições recomendadas. O substrato é sensível à luz e deve ser protegido da luz direta ou fontes de luz indiretas.
Utilização:
• Soluções de TMB devem ser preparadas no momento do uso. A estabilidade por longos períodos de tempo ainda não foi determinada.
• Preparar o buffer citrato-fosfato em pH 5,0 na concentração 0,05M.
• Remover a quantidade desejada do TMB em pó e dissolver em DMSO qualidade BM para a concentração final de 10 g/mL.
• Adicionar 100 L de solução de TMB para cada 100 mL de citrato-fosfato.
• Adicionar 2 L de peróxido de hidrogênio (30%) para cada 10 mL de citrato-fosfato.
• Misturar até homogeneização e adicionar 100 mL da solução de TMB preparada para cada poço, onde será formada a solução de coloração azul.
• Proceder à leitura de acordo com cada protocolo.
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