• O ladder é composto por quatorze fragmentos individuais de DNA purificados por cromatografia (em pares de base): 10000, 8000, 6000, 5000, 4000, 3500, 3000, 2500, 2000, 1500, 1000, 750, 500, 250.
• Ele contém três bandas de referência (6000, 3000 e 1000 bp) para facilitar a orientação.
• O ladder é dissolvido em tampão TE. Tampão estoque (tampão TE) 10mM Tris-HCl (pH 7.6), 1 mM EDTA 6X DNA Loading Dye 10mM Tris-HCl (pH 7.6), 0.03% azul de bromofenol, 0.03% xileno cianol FF, 60% glicerol e 60mM EDTA
• Protocolo para aplicação: Mistura para 5 mm de canaleta de gel de agarose: DNA Ladder 2µL 6X DNA Loading Dye 2µL Água deionizada 6 µL Volume total 10 µL .
DESCRIÇÃO:
• O marcador de peso molecular 1 Kb contém 14 fragmentos facilmente identificáveis – 0.25, 0.5, 0,75, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5, 3.0, 3.5, 4.0, 5.0, 6.0, 8.0, e 10.0 kb ? em géis de agarose a 0.8%.
• Os fragmentos de DNA são obtidos aproximadamente com a mesma intensidade, exceto os fragmentos correspondentes a 1 Kb, 3 Kb e 6 Kb, que são aproximadamente duas vezes mais intensos que os demais.
TAMPÃO DE ARMAZENAMENTO: 10 mM Tris-HCl (pH 8,0), 1 mM EDTA.
APLICAÇÕES:
• Identificação de massa molecular de fragmentos de DNA de fita dupla entre 250 bp a 10 Kb em géis de agarose.
• Identificação de fragmentos corados pelo brometo de etídeo ou por autoradiografia.
• Não se destina a quantificação de DNA em amostras.
PROCEDIMENTO RECOMENDADO:
• Para uma boa resolução recomenda-se a utilização de géis de agarose 0,8% – 1,0%.
• Adicionar 1,0 µL do marcador por canaleta adicionando de 2µL do tampão 6X Gel Loading dye.
• Agitar gentilmente e aplicar na canaleta correspondente.
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